的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
小鼠组织纤溶酶原激活剂(mouse t-PA)
小鼠转铁蛋白(mouse Transferrin)
小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(mouse TSLP)
小鼠血栓烷B2(mouse TXB2)
小鼠可溶性肿瘤坏死因子-a受体(mouse sTNF-aR)
小鼠组织多肽抗原(mouse TPA)
小鼠血小板生成素(mouse TPO)
小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(mouse TRAIL/APO 2L)
小鼠血栓调节蛋白(mouse TM)
小鼠血管细胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)
小鼠血管内皮生长因子(mouse VEGF)
小鼠血管内皮细胞生长因子B(mouse VEGF-B)
小鼠血管内皮细胞生长因子C(mouse VEGF-C)
小鼠血管内皮细胞生长因子D(mouse VEGF-D)
小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(mouse VEGF-R1)
小鼠血管活性肠肽(mouse VIP)
小鼠血管性血友病因子(mouse VWF)
小鼠血管内皮生长因子受体-2(mouse VEGF R2)
小鼠软骨糖蛋白39(mouse YKL-40)
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