ELISA结果的鉴定
一,准确性:免疫学专一性的测定。用免疫扩散、交叉电泳和免疫电泳测定抗原和抗体的纯度。如果是测定抗原(或半抗原),一般将放射免疫测定法(RIA)的结果作比较;如果是测定抗体,一般将免疫荧光法(IFA)的结果比较。用其他实验所得的数据来核证。例如病毒侵染动、植物机体后,会出现一系列病理变化,这些病理数据与病毒侵染量如存在线性关系,那么用ELISA测定病毒的量应与病理数据的变化相一致。多次实验,将每次ELISA结果进行比较。
二,精确度:将同一样品进行一系列不同浓度的测定,得到浓度范围广泛的一条曲线,选择该曲线坡度陡、重复性好的区域作为测定范围。对ELISA测定范围的确定,有益于选择实际使用的合适浓度。
三,灵敏性:ELISA的灵敏性高,它对许多抗原的测定,灵敏度可达1-10ng/ml。作出ELISA某种方法灵敏度高低的结论要慎重,因为许多因素会影响ELISA的灵敏度,例如抗体的效价、酶的活性、酶标记抗体的质量、反应的时间与温度、载体的吸附力、底物的浓度与pH等。只有在条件严格一致的情况下才能作出比较。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
电话
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