雌二醇Elisa试剂盒的样本处理要求

　　雌二醇Elisa试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合雌二醇分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性雌二醇的病人样本与辣根过氧酶标记的雌二醇竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后，未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中雌二醇的浓度成反比。加入底物液后，所显示的颜色强度与病人样品中雌二醇的浓度成反比。

　　雌二醇Elisa试剂盒样本处理及要求：

　　1.血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　2.血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　3.组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

　　雌二醇Elisa试剂盒的结果计算：

　　1.计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。

　　2.用吸光度值作为纵坐标（y），浓度值作为横坐标（x），以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘，作一标准曲线。

　　3.用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。

　　4.自动计算方法：在IFU上，它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。

　　5.样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。