曾经常常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个疑问的答案可以很简单,也可以很复杂。若是这种细胞是购自ATCC或其他的细胞库,那很简单,问供货商就行了。或参考有关的文献。Invitrogen上有一个Cell Line Database的东西,也很好用。挑选你感兴趣的细胞类型,它就会显示相应的培养基、血清和转染试剂等,有时还有优化好的转染进程,很方便。Sigma上也有一个Media Expert,包括培养基一切成分的功用描绘、运用推介和参阅文献等,它仍是一个解决问题的能手,关于细胞培育中的常见疑问,如细胞贴壁欠好、培养基变色等,它都会列出相应的缘由,并提供解决的办法。
如果你是准备树立一种全新细胞的培育体系,并且找不到任何参阅,那你就得花时间自己实验了。在MEM中培育的细胞,很能够在DMEM或M99中成长。总之,MEM做贴壁细胞培育、RPMI 640做悬浮细胞培育是一个好的开始。你也可以购买多种培养基,然后花大概两周的时间先做一个比较简单的细胞成长试验,然后从中挑选zui合适的。
以前大多数实验室都是用干粉培养基,但是制作的过程比较麻烦,需要溶解、调节pH值,过滤,在此过程中还会发生浓度误差,而且有些实验室的水质并不抱负,所以培育的效果会有差别。如果使用液体培养基,这种人为的误差会降低。可能你会觉得液体培养基比较贵,以前是这样,但是现在不一样了。HyClone和Invitrogen都在国内建立了液体培养基的生产基地,生产和运输的成本大大下降,所以如今的价格也比较便宜,比干粉培育基贵不了多少,而且还帮你省了过滤器和时间。
血清富含成长因子,可以推进细胞的繁衍,富含的附着因子可推进细胞的贴壁,一起还具有抗活性。血清也是矿物质、脂类及激素的重要来源。zui常用的血清有小牛血清、重生牛血清、胎牛血清和马血清等。牛血清是按照采血时间的早晚来分类的。采血时间越早,营养物质越丰富,所含抗体也越少,因而胎牛血清适合需求高的细胞系和克隆化培育。由于疯牛病的原因,到目前为止,中国政府依然制止从北美洲、欧洲和日本等地区进口牛血清,因此国内市面上的牛血清大多来自澳洲、南美洲,或是国产的。
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