原位杂交结合免疫组织化学技术主要用于在同一细胞 内同时或先后检测特定基因在核酸和蛋白质或多肽水平的表达,这样。不仅能了解基因表达,而且还能研究某种基因表达的翻译和转录调节。如果免疫组织化学检测的抗原成分是与原位杂交的靶核酸不同基因编码的蛋白质或多肽等,那么同时使用原位杂交和免疫组织化学技术可研究一种基因的转录与另一种基因编码的蛋白质合成之间的相互关系。在病毒学研究中,将原位杂交与免疫组织化学相结合.可在细胞水平上同时研究病毒基因及其表达产物。即病毒抗原的分布。如果将检测病毒基因的原位杂交与检测细胞类型特异性抗原的免疫组织化学相结合,则可鉴别受染细胞的类型,尤其对在含多种细胞类型的组织(如神经组织)中确定受染细胞的类型更有帮助。总之,原位杂交和免疫组织化学结合的双标记技术在深入研究基因表达的调控以及病毒性疾病的发病机制等方面具有广阔的应用前景。
原位杂交结合免疫组织化学技术可以分别在相邻的连续切片上进行。只要在相邻切片上能得到同一细胞的连续切面。对照观察相邻切片上同一细胞切面原位杂交和免疫组织化学结果,就可以判断在同一细胞内是否存在特定的靶核酸DNA或RNA和由该基因或另一种基因编码的蛋白质或多肽。
原位杂交结合免疫组织化学技术更多的是在同一细胞标本或组织切片上进行,这样可避免因相邻切片法观察时不易找到同一细胞的切面而产生的空间误差和样本误差。但采用同一切片的双标记技术时。*次标记染色过程总要或多或少地影响第二次标记染色的结果,使第二次染色结果不很理想。
在同一细胞和切片标本上进行原位杂交和免疫组织化学双标记时.可以先用原位杂交检测核酸,也可以先用免疫组织化学检测蛋白质.不同的检测程序各有其优缺点。
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