​ELISA试剂盒使用原理

?ELISA试剂盒使用原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠细胞间粘附分子 (ICAM-)水平。用纯化的大鼠细胞间粘附分子 (ICAM-)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入细胞间粘附分子 (ICAM-)，再与 HRP 标记的细胞间粘附分子 (ICAM-)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的细胞间粘附分子 (ICAM-)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠细胞间粘附分子 (ICAM-)浓度。
?ELISA试剂盒使用原理是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的?ELISA试剂盒使用原理其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。