细胞污染的清除

细胞污染的清除
培养细胞一经污染，多数较难处理。如果污染细胞价值不大，宜弃之；有细胞株留存的或可购置的，可在寻找原因后*消毒操作室，复苏或重新购置细胞，再培养。若污染细胞价值较大，又难于重新得到，可采取以下办法清除。
（一）使用抗生素
抗生素对杀灭细菌较有效。联合用药比单独用药效果好。预防用药比污染后再用药效果好。预防用药一般用双抗生素（00u/mL加00μg/mL），污染后清除用药需采用大于常用量5～0倍的冲洗法，于加药后作用24～48小时，再换常规培养液。此法在污染早期可能有效。所用抗生素品种除、外，还可用、、多粘菌素、四环素、等。常用400～800μg/mL或200μg/mL四环素处理，每隔2～3日换液次，传～2代进行治疗。近年来有报道，4-氟，2-羟基喹啉（Ciprofloxacin,Cip）、截耳素衍生物（Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-和四环素衍生物（BM-2）等三种抗生素单用或合用对杀灭支原体有效。这三种抗生素均用配成250X浓缩液，-20℃保存备用，使用浓度Cip为0μg/mL，BM-为0μg/mL，BM-2为5μg/mL。使用时先吸除污染的培养液，加入含BM-的RPMI640培养液，3天后再吸除培养液，加入含BM-2的RPMI640培养液，培养4天，如此连续3个轮次，直至用33258荧光染色镜检证明已清除支原体后，再加正常培养液培养传代3-4次。