国产ELISA试剂盒克隆化的方法软琼脂平板法分析

国产ELISA试剂盒克隆化的方法软琼脂平板法分析

．国产ELISA试剂盒配2.5%的琼脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。

2．将7ml*DMEM液和3ml0倍浓度的DMEM液混合，置45℃水浴预热。

3．将琼脂糖与DMEM液混合，即为含0.5%琼脂糖的*DMEM液，并加75×08脾细胞。

4．每块平皿加0ml，于室温中凝固。

5．DMEM中的细胞与DMEM—琼脂:混合，将细胞琼脂混合物2ml铺于凝固的平板上，使其全部覆盖。

6．放入CO2箱饱和湿度，37℃培养0天。

7．用PBS配制0.6%琼脂糖，于沸水浴溶解后，置45℃，在保温情况下取一试管，国产ELISA试剂盒迅速加入0.ml25%羊红血球，0.2ml豚鼠补体，2.7ml0.6%琼脂糖。

8．用3ml琼脂糖—羊红血球混合液覆盖克隆。于37℃CO2箱孵育h~2h。从克隆上部溶解羊红血球的溶血范围，可筛选抗羊红血球Ig。