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国产ELISA试剂盒标本常用的反应剂配制方法

发布时间:2022-11-15      点击次数:415

国产ELISA试剂盒检查葡萄糖试剂 
配方一 本尼迪克(Benedict)溶液
() 在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克。
(2) 在50毫升加热的蒸馏水中溶解8.5克硫酸铜。
把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能使用(存放时间较久而产生沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制)。
本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出0.5 ~0.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。
配方二 裴林(Fehling)溶液
()把34.5克硫酸铜溶于500毫升蒸馏水中。
(2)把25克氢氧化钾(钠)和73克酒石酸钾钠溶解在500毫升蒸馏水中。
上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。
2、检查淀粉的试剂
鲁哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)
取6克溶于20毫升蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸馏水,贮存在棕色试剂瓶内。
碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。
3、检查蛋白质的试剂
配方一 米伦(Millon)试剂
在60毫升浓硝酸(比重.42)中溶解40克汞(水浴加温可助溶),溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可保存。
在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。
配方二 双缩尿试剂
分别配制0%氢氧化钠溶液和%硫酸铜溶液。
在3毫升待测物中加入毫升0%氢氧化钠溶液和滴%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。
4、检查脂肪的试剂
苏丹Ⅲ(Ⅳ)酒精饱和溶液
取0.2克苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ),放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。
5、酸碱指示剂
配方一 试剂和试纸
试剂 取克,溶解在00毫升60%的酒精溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。
酚态试纸 取克,溶解在00毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸馏水。把绿纸条放入溶液中浸湿后,取出,放在无氨气影响处晾干。
国产ELISA试剂盒酚泰试剂(试纸) pH值变色范围8.2~0,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。
配方二 红蓝石蕊试纸
取市售石蕊克,放在80毫升0%酒精溶液中搅拌,使它溶解,然后过滤。把滤液分成两份。份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出现红色为止。另份滴入稀氢氧化钠溶液,到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条,随后取出滤纸条,放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干,即的红、蓝两种石蕊试纸。
红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。
6、检查二氧化碳的试剂
检查二氧化碳的试剂,可用溴代蓝溶液和石灰水。
配方一 溴代蓝溶液
取0.克溴代蓝,溶解在00毫升蒸馏水里,滴入少量0.%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。
溴代蓝溶液pH值变色范围是6.0(黄)~7.6(蓝)。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。
配方二 石灰水
在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙),变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。
如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。
7、检查细胞生活力的试剂
检查细胞有无生活力,可用中性红甲基蓝试剂。国产ELISA试剂盒配制的方法是先分别配制%中性红溶液和%甲基蓝溶液,这两种溶液各取份混合。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色。

 

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