进口ELISA试剂盒自问世以来,以其敏感性高,特异性强,操作简便、安全,开创了免疫学诊断的在临床诊断方面得到了广泛的应用。但是在它的研究、生产及使用中常常会碰到非特异性显色问题,ELISA试剂盒特异性、检验标本中含酶标记物的干扰物,操作不当等因素都会导致这样的结果。本文就在实验过程中产生的一些原因及如何采取一些措施,消除非特异性显色作以分析。
风湿因子(RF)、黄疸等,类风湿因子是可作用于多种动物以及人IgGFc段的自身抗体,多数为IgM类,能充当抗原成分与固相及酶标抗体反应,从而呈现非特异性显色。
黄疸血标本中常含有内源性过氧化物酶,如用辣根过氧化物酶为标记物,就有可能产生非特异性显色。
常因样品采集、贮存、处理不当造成如样品溶血,被细菌污染,标本凝集不全等。溶血标本,红细胞溶解破裂,释放出血红素形成,而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP(辣根过氧化酶),有国内报道酶免HBsAg试剂检测溶血标本时可造成假阳性。如在冰箱中保存过久,其中的IgG可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。因此,血标本在采集处理时应小心,在冰箱中保存不易过久。
综上所述,尽管目前上以及我国有了部分标准血清或参比血清(血清盘),但是酶联免疫吸附技术目前在技术上尚未做到标准化。受方法学及技术条件的限制,在酶联免疫吸附测定中有时不可避免的会出现一定的非特异性,我们可以通过以上措施把进口ELISA试剂盒非特异性显色降至zui低限底,从而提高检测的特异性,并得到更准确、可靠的实验结果。
免疫测定用 (曾用名:) 标准品 50555-9003 22.8IU/支
细菌内毒素检查 细菌内毒素 标准品 98 9000EU/支
细菌内毒素检查 细菌内毒素 工作标准品 / 0支/盒
可用于建立动物发热模型 细菌内毒素 精品 50602-0202 mg/支
含量测定用 盐酸 对照品 7202-200303 50mg
含量测定 磷酸可待因 对照品 7203-200303 50mg
含量测定 福尔可定 对照品 205-200203 00mg
含量测定 O6-单乙酰盐酸盐 对照品 7207-20052 20mg
含量测定 O3-单乙酰氨基磺酸盐 对照品 7208-200508 20mg
含量测定 乙酰可待因 对照品 7209-200507 20mg
含量测定 盐酸甲基安非它明 对照品 722-9802 20mg
含量测定 蒂巴因 对照品 726-200403 00mg
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