为了成功的操作
小鼠ELISA试剂盒,需要在确立稳健的多色配色方案,确定正确对照和进行重复性好的分析上花费大量的时间和精力。除了资源共享实验室和核心设备花费大量的时间在仪器质量控制上,研究人员也会把质量控制结合进他们的实验中。质量控制管能实现确保实验之间的PMT电压一致,能确保实验正确进行并且能确保设门策略具有说服力。
洗板时容易造成误差:因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动;
小鼠ELISA试剂盒的显色问题:使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候,要先查看显色剂本身的情况;
试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻;
加样中可能遇到的问题:在做血清或是血浆用于检测试剂的时候,会碰到血清血浆不好分离的情况,这个时候的解决办法是先放在常温中到2小时,然后在进行离心处理;
读板:读板的时候首先应该保证板的清洁干净;
终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,差生气泡,造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒;
一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到5pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
根据检测标本数量确定所需试剂的量;
按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂;
准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等;
标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存。