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四角瑞氏绦虫探针法荧光定量PCR检测试剂盒准备试剂与收集血样

发布时间:2022-11-15      点击次数:446

准备试剂与收集血样:
双重核酸试剂盒(荧光PCR法) .  收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反复冻融。
2.  标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 20 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 20 0ng/ml 的标准品溶液 00ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  0× 标本稀释液用蒸馏水作 : 0 倍稀释( 示例: ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4.  洗涤液:用重蒸水 :20 稀释(示例:ml 浓缩洗涤液加入 9ml 的重蒸水)
检测程序:
.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 00ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 20 分钟。
2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液0 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板:同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液00ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板:同前。
7.  每孔加入底物工作液00ul ,置 37   ℃ 暗处反应5 分钟。
8.  每孔加入00ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

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