操作步骤:
. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔0孔,在di一、第二孔中分别加标准品00μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取00μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟.
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟。
ADAR (C-terminus)双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体(C端)
AF0髓系、淋巴、混合系白血病易位基因0抗体
ADCY腺苷酸环化酶抗体
APC腺瘤样息肉抗体
AGPAT溶血磷脂酰基转移酶抗体
ANKS3锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体
phospho-ALK (Tyr586)磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
ACADVL酰基脱氢酶很长链抗体
AMSH信号转导衔接结合蛋白抗体
ASB3锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体
Aurora C有丝分裂激酶B抗体
Phospho-Ack (Tyr284)磷酸化Ack抗体
Phospho-Ack (Tyr326)磷酸化Ack抗体
Phospho-beta-Arrestin (Ser42)磷酸化β抑制蛋白抗体
Phospho-Aurora A (Thr288)磷酸化有丝分裂激酶A抗体
phospho-APS(Ser598)磷酸化APS抗体
Aurora A有丝分裂激酶A抗体
AIM2干扰素诱导蛋白AIM2抗体
Aquaporine 2水通道蛋白-2抗体
ABI2肿瘤抑制基因ABI2/蛋白激酶结合蛋白抗体
ARLADP核糖基化因子样抗体
ARMCX3ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体
ARMCXARM重复X连锁蛋白ARMCX抗体
ARMCX2ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体
Apg0自噬相关蛋白0抗体
ACBD6酰基结合结构域蛋白6抗体
Aminoacylase 氨基酰化酶抗体
Adipose Triglyceride Lipase脂肪甘油三酯脂酶抗体
phospho-AMPK alpha- (Thr72)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α抗体
Amphiregulin双调蛋白(结肠直肠细胞源性生长因子)抗体
phospho-AQP2(Ser264)磷酸化水通道蛋白2抗体
AXL粘附相关激酶抗体
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