人延伸蛋白A(EloA)ELISA试剂盒​洗涤方法

洗涤方法：

. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。

实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。

.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液00μl，余孔分别加标准品或待测样品00μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 00μl(在使用前5分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育小时。

3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前5分钟内配制)00μl，加上覆膜，37℃温育小时。

5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。

6.每孔加底物溶液00μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育5分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。

7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。

9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）

MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞

MM, 小鼠小胶质细胞

mCF, 小鼠心脏成纤维细胞

MN-c, 小鼠皮质神经元

 细胞名称

人绒毛膜毛细血管内皮细胞

人羊膜上皮细胞

人绒毛间充质成纤维细胞

人羊膜间充质基质细胞

人绒毛膜间充质基质细胞

 细胞名称

NRK-52E，大鼠肾细胞

H9c2大鼠心肌细胞（ATCC来源）

NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系

大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）

HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系

CHO, 中国仓鼠卵巢细胞系

COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞

SF9, 昆虫卵巢细胞

BRL 3A, 大鼠肝正常细胞

HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞

HET-A, 人食管上皮细胞

RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞

GC-, 鼠精原细胞

293A，人胚肾上皮细胞系（腺病毒包装级别）

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞

293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系

EPC, 大鼠血管内皮祖细胞

HBE, 正常人支气管上皮细胞系

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞

HUVEC-2, 人脐静脉血管内皮细胞系

HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞

HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞