人转录因子E2F1试剂盒激活方法与检测程序方法

激活方法：

1. 将450ul 标本稀释液加入到一支 1.5ml 进口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血浆标本。

2. 加20ul 1 N HC I ,盖紧，上下混匀。 2 － 8 ℃ 放置60± 2 分钟。

3. 加20ul 1 N NaOH, 盖紧，上下混匀。

4. 即用，或放-20/-70 ℃ 保存3 天。计算结果时乘 以稀释倍数 50 。 （ 注意：不同的标本E2F1 的水平可能有较大差异，请根据实际情况灵活掌握稀释度）

5. 细胞培养上清或组织匀浆 10 倍稀释 (410ul 的标本稀释液＋ 50ul 样本＋ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品（已激活） 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3. 每孔中加入第一抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4. 洗板：同前。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

6. 洗板：同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。

8. 每孔加入100ul 终止液混匀。

9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

人肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2

人肾小管上皮细胞；HKC

人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2

人胚胎气管组织来源细胞；CCC-HBE-2

人胚肾二倍体细胞；CCC-HEK-1

人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1

人胚胎心肌组织来源细胞；CCC-HEH-2

人胚胎肠粘膜组织来源细胞；CCC-HIE-2

人胚胎胰腺组织来源细胞；CCC-HPE-2

人胚胎肌肉组织来源细胞；CCC-HSM-2

人葡萄膜黑色素细胞；UM

人胚肺成纤维细胞；WI-38 [WI38]

SV40T转化的人胚肾细胞（亚系）；293T/17

293来源病毒包装细胞；ΦA

293来源病毒包装细胞；ΦA-GP

人永生化表皮细胞；HaCaT

SV-40转化肺成纤维细胞；WI38/VA13

人乳腺上皮细胞；MCF-10A

人胚肺成纤维细胞；MRC-5

人胚肺二倍体细胞；2BS

人胚肺二倍体细胞；KMB-17

人胚肾细胞；293 [HEK-293]

人脐静脉内皮细胞；HUV-EC

人肺细胞；HLF-a

人胚肺成纤维细胞；WI-38 [WI38]

人胎儿胸腺细胞株；HFT-8810 [HFT8810]

人胚肺成纤维细胞；HFL1

人胚肾细胞；293 [HEK-293]

人羊膜细胞；HA

人胚肺成纤维细胞；HFL-I

人肝细胞；HL-7702[L-02]

人肝细胞；QSG-7701 [QSG7701]

人胚肺成纤维细胞；WI-38 [WI38]