小鼠ELISA试剂盒的实验原理及操作步骤

发布时间：2022-11-15 点击次数：463

小鼠ELISA试剂盒用纯化的小鼠NLRP3抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入小鼠NLRP3，再与HRP标记的NLRP3抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的NLRP3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠NLRP3浓度。

　　小鼠ELISA试剂盒操作步骤：

　　1.细胞上清：

　　处理前有必要是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可.假如浓度太高需稀释时,用规范品稀释液直接稀释.

　　2.脑脊液：

　　处理前有必要是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可.假如浓度太高需稀释时,用规范品稀释液直稀释.

　　3.血清血浆：

　　请参加50ul样本剖析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本剖析缓冲液等量参加,缺乏部分用规范品稀释液补充至100ul.

　　A.血清标本应是自然凝结后,取上清,防止在冰箱中凝结血液；

　　B.血浆标本,引荐用EDTA的方法搜集若待测样本不能及时检测,标本搜集后请分装,冻存于－20℃,防止反复冻融.

　　C.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；

　　D.标本应清澈通明,检测前样本中如有悬浮物应经过离心去除.

　　E.请勿运用溶血,高血脂或污染的标本检测,不然成果将不准确.