免疫细胞化学粘附剂

粘附剂

在免疫细胞化学工作中，由于标本（如切片）的脱落常影响工作的质量的速度，故粘附剂的选择和使用就显得较为重要。

、铬矾明胶液

试剂：铬矾　　　　　　　     　0.5 g

  明胶（Gelatine）　　　     5 g

  　 H2O　　　　　　　　　 ~000 ml

方法：在000 ml的烧杯或烧瓶中，以500～800 ml H2O加温溶解明胶，待其*溶解后，再加入铬矾。注意温度过高易使明胶烧糊，包被玻片时控制水温在70 ℃。如有明显残渣，过滤后使用。

2、甲醛-明胶液

试剂：40%甲醛　　　　　　2.5 ml

    　明胶　　　　　　　　0.5 g

   蒸馏水　　　　　　　至00 ml

配制方法：用少许蒸馏水（约80 ml）加热溶解明胶，待*溶化后，加入甲醛，zui后补充蒸馏水至00 ml混匀即可。细胞

3、多聚赖氨酸（Poly-L-Lycine,PLL）

试剂：多聚赖氧酸　　　　　 5 g

    　　蒸馏水　　　　　　 ~000 ml

配制方法：称取PLL，溶于H2O，充分混合即可，此液浓度为0.5%，可适当稀释配成0.0～0.5%浓度。4 ℃保存，也可-20 ℃备用。PLL可反复冰冻，效果无明显影响，工作液常再稀释0～50倍。

4、Vectabond试剂　　该试剂是Vector公司新进推出的一种新型玻片粘附剂。该试剂与一般的粘附剂不同，它是通过对玻璃表面起化学修饰作用，改变其表面的化学物理特性，使组织切片牢固地贴于玻璃片上，贴上后不易脱落，保留时间较久。一个试剂盒（7 ml）可配成350 ml工作液（用丙酮配）。处理载玻片前（事先酸处理），用染色缸装好各种液体，按下列程序进行：

干净载玻片→丙酮5 min→Vectabond试剂工作液（7 ml Vectabond+ 350 ml丙酮）：将载玻片用镊子夹住浸入Vectabond试剂～2次→dH2O，2×5 min→干燥（37 ℃过夜）→用铝箔包好，室温存放备用。细胞

注意：避免污染（尘埃等）；综上述方法处理的载片一般可存放半年以上。