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结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒紫外分光光度法
50 管/48 样 25管/24样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
GBSS(EC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀
粉的合成。
测定原理
GBSS 催化 ADPG 与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成
ADP;进一步通过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和 6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催
化 NADP+还原为 NADPH,其中 NADPH 生成量与前一步反应生成的 ADP 数量呈正比,通
过 340nm 下测定 NADPH 的增加量,可以计算 GBSS 活性。
需自备的的仪器和用品
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液:液体 60mL×2 瓶,4℃保存;
试剂一:50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 14mL 试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 8mL 试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 17mL 试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂五:液体×1 支,-20℃保存;临用前加入 1mL 蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分
装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂六:粉剂×1 支,-20℃保存;临用前加入 1mL 蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分
装后-20℃保存,禁止反复冻融;
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