免疫测定中的干扰机制

    HA 的产生机制至今还不能阐明，目前所使用的免 疫试剂抗体大多源于实验动物，因此，体内含HA 的患者在做血清免疫检测时，HA 可与试剂抗体结合而导致干扰。HA 通常与试剂抗体的Fc 区表位或者F(ab’)2 区域的决定簇结合。目前公认的HA 在免疫测定中的干扰机制主要发生在夹心免疫测定法和竞争免疫测定法中。  

HA在夹心免疫测定法中的干扰机制

    ELISA夹心法测定中，HA与试剂抗体（捕获抗体和标记抗体）的结合，可通过Fc-Fc 和Fab-Fab两种结合方式干扰测定。正常情况下，在ELISA 夹心法中，待测抗原同时与捕获抗体和标记抗体结合，形成了固相捕获抗体-待测抗原-标记抗体的复合物。在以Fc-Fc 的方式结合的机制中，HA的Fc 端结合到捕获抗体的Fc 段上，而HA的Fab 区域则结合到标记抗体的Fab 区域上，导致假阳性结果。在以Fab-Fab 结合方式的机制可引起假阳性或假阴性的结果，如HA的Fab区域通过分别结合捕获抗体的Fab区域和标记抗体的Fab 区域，阻挡捕获抗体和标记抗体与待测抗原的结合，从而导致假阴性；HA的F(ab’)2 通过同时结合捕获抗体的Fab区域和标记抗体的Fab区域，形成固相捕获抗体-HA-标记抗体复合物，如果标本中无待测抗原，HA就引起假阳性的结果。

HA在竞争免疫测定法中的干扰机制

    在免疫竞争法测定中，HA干扰也可造成假阳性或假阴性。在正常的竞争性免疫反应中，待测抗原与标记抗原竞争的结合到连接在载体上的捕获抗体，形成正常的反应复合物。但是如果反应体系中存在HA，测定结果将可能出现假阳性或假阴性的现象。造成假阴性结果的机制：HA通过同时结合捕获抗体和标记抗原，形成异常的反应复合物，干扰捕获抗体结合检测抗原，消耗可结合待测抗原的捕获抗体，从而导致假阴性。造成假阳性结果的机制：HA直接结合捕获抗体与抗原结合的部位，形成异常的复合物，占据捕获抗体结合待测抗原或标记抗原的结合空间，消耗可结合待测抗原或标记抗原的捕获抗体，导致假阳性。

3-位点免疫检测法中的干扰机制

    该干扰存在于肌钙蛋白I的免疫检测中。所谓的3-位点是试剂盒中含有针对肌钙蛋白I分子上3个不同抗原决定簇的3种抗体，肌钙蛋白I可以同时结合2个捕获抗体与个示踪抗体或者个捕获抗体与2个示踪抗体，使特异性和灵敏度大大提高，后者可使反应的灵敏度进一步增高。由于肌钙蛋白I 3-位点免疫测定增加了一种捕获抗体或者标记抗体，这也同时提高了捕获抗体或者标记抗体与HA结合的机率，从而导致肌钙蛋白I 3-位点免疫测定比肌钙蛋白I 双位点免疫测定更加容易受到HA的干扰，结合的部位与上述两种机制相似。