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实验时依次在微孔板中加入样本及标准品,并加入 HRP 标记的 ABP 抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,反复洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再用硫酸终止反应,转变成黄色。颜色的深浅和样品中的 ABP含量呈正相关。采用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度(OD 值),根据标准曲线,计算测试样品中 ABP 浓度。
样品收集、处理及保存$r$n. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以000g离心5分钟,收集上清。$r$n2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到04-06/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商沟通,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
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